ਰਸਾਇਣ

ਜੈਨੇਟਿਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਟੂਲ


ਡੀਐਨਏ- ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ-ਨਿਰਭਰ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ

ਐਨੀਮੇਟਡ 3D ਮਾਡਲ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹਣ ਲਈ ਤਸਵੀਰ 'ਤੇ ਕਲਿੱਕ ਕਰੋ; PDB ਕੋਡ: 1TAQ।

ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮਾਂ ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ, ਤਾਪ-ਸਥਿਰ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਹਰੇਕ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਨਵੇਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਜੋੜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਚੱਕਰਵਰਤੀ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਸਮਰੱਥ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਫਰੈਡਰਿਕ ਸੈਂਗਰ ਡੀਐਨਏ ਸੀਕੁਏਂਸਿੰਗ (ਚੇਨ ਸਮਾਪਤੀ ਵਿਧੀ) ਵਿੱਚ, ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਉਤਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਵੀ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ-ਵਰਤੇ ਗਏ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਨਿਸ਼ਾਨਦੇਹੀ, ਉਦਾਹਰਨ ਵਿੱਚਨਿੱਕ ਅਨੁਵਾਦ ਸੋਧੇ ਹੋਏ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨ ਲਈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਪਾਬੰਦੀਆਂ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਓਵਰਹੈਂਗਿੰਗ ਸਿਰਿਆਂ ਨੂੰ ਭਰਨ ਨੂੰ ਉਤਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ।

ਨੋਟ ਕਰੋ
ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਵਿਸਤਾਰ ਲਈ ਇਹ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ ਕਿ ਵਰਤੇ ਗਏ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਹੁਣ ਕੋਈ 5'-3' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਨਵਾਂ ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਫਿਰ 5' ਸਿਰੇ ਤੋਂ ਟੁੱਟ ਜਾਵੇਗਾ।

Klenow ਟੁਕੜਾ ਇਸ ਲੋੜ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਦਾ ਹੈ. ਇਹ ਅਣੂ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ I ਹੈ, ਜਿਸ ਦੀ 5'-3' ਐਕਸੋਨਯੂਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਇੱਕ ਛੋਟੇ ਐਮੀਨੋ-ਟਰਮੀਨਲ ਖੇਤਰ ਨੂੰ ਕੱਟ ਕੇ ਹਟਾ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਕਈ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਹੁਣ ਉਪਲਬਧ ਹਨ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੀ 5'-3 'ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਗਈ ਹੈ ਜਾਂ ਹਟਾ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਹੈ।

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ ਇੱਕ ਆਰਐਨਏ-ਨਿਰਭਰ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਹੈ ਜੋ ਰੈਟਰੋਵਾਇਰਸ ਦੁਆਰਾ ਏਨਕੋਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਇਹ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇੱਕ ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੀ ਡੀਐਨਏ ਕਾਪੀ ਬਣਾਉਣ ਦੇ ਯੋਗ ਹੈ।

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ ਦੀ ਖੋਜ ਨੇ ਪ੍ਰਚਲਿਤ ਰਾਇ ਦਾ ਖੰਡਨ ਕੀਤਾ ਕਿ ਕੁਦਰਤ ਵਿੱਚ ਜੈਨੇਟਿਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਕਦੇ ਵੀ ਡੀਐਨਏ ਤੋਂ ਆਰਐਨਏ ਵਿੱਚ ਵਹਿੰਦੀ ਹੈ।

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ ਦੀ ਮਦਦ ਨਾਲ, cDNA ਅਣੂ ਸੈਲੂਲਰ mRNA ਤੋਂ ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਿਤ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ cDNA ਲਾਇਬ੍ਰੇਰੀਆਂ ਵਿੱਚ ਮਿਲਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। cDNA ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਗਠਨ ਨਾਲ ਵੈਕਟਰਾਂ ਵਿੱਚ ਕਲੋਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਟੈਸਟ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਦੇ ਅਧੀਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, mRNA ਅਣੂਆਂ ਦਾ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਬਲੋਟਿੰਗ ਦੌਰਾਨ cDNA ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਜੀਨ ਪੜਤਾਲਾਂ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਕੁਝ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ ਹੇਠਾਂ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ:

ਤਬ ।੧।ਰਹਾਉ
ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਸ
ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਆਈ.ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਐਸਚੇਰੀਚੀਆ ਕੋਲੀ 3'-5 'ਅਤੇ 5'-3' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਨਾਲ। ਇੱਕ ਕੋਫੈਕਟਰ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਬਣੋਐਮ.ਜੀ2+- ਆਇਨਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ। ਤਿੰਨ ਐਨਜ਼ਾਈਮਿਕ ਕਿਰਿਆਵਾਂ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਤਿੰਨ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਡੋਮੇਨਾਂ ਵਿੱਚ ਸਥਿਤ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸਲਈ 5'-3 'ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਕਲੇਨੋ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਦੀ ਇਜਾਜ਼ਤ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ।
T4 ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ਇਹ T4 ਕੋਲੀ ਫੇਜ ਦੁਆਰਾ ਏਨਕੋਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਸ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਵਿੱਚ 3'-5' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਪਰ ਇਸ ਵਿੱਚ 5'-3' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਘਾਟ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। T4 ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਕਲੇਨੋ ਟੁਕੜੇ ਦੇ ਸਮਾਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਬਹੁਤ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਉਤਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।
T7 ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ਇਹ T7 ਕੋਲੀ ਫੇਜ ਦੁਆਰਾ ਏਨਕੋਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਸ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਵਿੱਚ ਕਲੇਨੋ ਫਰੈਗਮੈਂਟ ਅਤੇ T4 ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਵਰਗੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਹਨ, ਪਰ ਇਸਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਬਹੁਤ ਲੰਬੇ ਡੀਐਨਏ ਖੇਤਰਾਂ ਦਾ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਟਾਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ਇਹ ਥਰਮੋਫਿਲਿਕ ਪ੍ਰੋਕੈਰੀਓਟ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ (ਥਰਮਸ ਐਕੁਆਟਿਕਸ) ਅਤੇ ਇਸਦਾ ਸਰਵੋਤਮ ਤਾਪਮਾਨ ਲਗਭਗ 80 ਹੈ ° C ਟਾਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਕੋਈ 3'-5' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਹੀਂ ਹੈ।


ਵੀਡੀਓ: ЯК ХИЗМАТЧИИ ҲАРБӢ ДАР ТОҶИКИСТОН БАРОИ ТАЙЁРӢ БА ИНҚИЛОБ БА 7 СОЛИ ЗИНДОН МАҲКУМ ШУД (ਦਸੰਬਰ 2021).